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生物堿試劑沉淀蛋白質的原理:
植物體內具有顯著生理作用的含氮堿性化合物成為生物堿。能沉淀生物堿或與其產生顏色反應的物質稱為生物堿試劑。當溶液PH小于等電點時,蛋白質顆粒帶正電荷,容易與生物堿試劑的負離子發生反應而沉淀。
生物堿試劑本質就是酸類,它們一般均導致蛋白質變性。
因為反應機理是,跟蛋白質側鏈上陽性離子(如氨基等)發生酸堿成鹽反應,而側鏈氨基常參與蛋白質的高結構或酶的活性中心,因此變性。(蛋白質鹽是很大的分子,沉淀是很自然的)。
生物堿的堿化、提取、滴定處理程序
按下列任何一種方法處理后測定
①將有機溶劑蒸干,于殘渣中加定量過量的酸滴定液使溶解,再用堿滴定液回滴剩余的酸;若生物堿易揮發或分解,應在蒸至近干時,先加入酸滴定液"固定"生物堿,再繼續加熱除去殘余的有機溶劑,放冷后完成滴定。
②將有機溶劑蒸干,于殘渣中加少量中性乙醇使溶解,任何用酸滴定液直接滴定。
③不蒸去有機溶劑,而直接于其中加定量過量的酸滴定液,振搖,將生物堿轉提入酸液中,分出酸液置另一錐形瓶中,有機溶劑層再用水分次振搖提取,合并水提取液和酸液,后用堿滴定液回滴定。
按照生物堿的基本結構,已可分為60類左右。主要有以下類型:
1、有機胺類,如麻黃堿、益母草堿、秋水仙堿。
2、吡咯烷類,如古豆堿、千里光堿、野百合堿。
3、吡啶類,如菸堿、檳榔堿、半邊蓮堿。
4、異喹啉類,如小檗堿、嗎啡、粉防己堿。
5、吲哚類,如利血平、長春新堿、麥角新堿。
6、莨菪烷類,如阿托品、東莨菪堿。
7、咪唑類,如毛果蕓香堿。
8、喹唑酮類,如常山堿。
9、嘌呤類,如咖啡堿、茶堿。
10、甾體類,如茄堿、浙貝母堿、澳洲茄堿。
11、二萜類,如烏頭堿、飛燕草堿。
12、其他,如加蘭他敏、雷公藤堿。
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